Mouse CCK(cholecystokinin)Elisa Kit

产品参数灵敏度检测范围5.6pg/m15.6–1000pg/ml本试剂盒适用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其它生物体液。9570金沙登录入口生产的 ELISA 试剂盒采用“夹心法”:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的靶蛋白,生物素化的检测抗体与靶蛋白结合, SABC 复合物与生物素化检测抗体结合,形成免疫复合物,加入TMB 显色液后,若反应孔中有靶蛋白则显蓝色,加入终止液变

现价:2500.00
货号:EM31076S/EM31076M
规格: 48T 96T
样本类型: 体液 非体液
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产品参数

灵敏度检测范围

5.6pg/m

15.6–1000pg/ml


本试剂盒适用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其它生物体液。


9570金沙登录入口生产的 ELISA 试剂盒采用“夹心法”:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的靶蛋白,生物素化的检测抗体与靶蛋白结合, SABC 复合物与生物素化检测抗体结合,形成免疫复合物,加入TMB 显色液后,若反应孔中有靶蛋白则显蓝色,加入终止液变黄色,检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在 450 nm 处测 OD 值,靶蛋白浓度与OD 值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出标本中靶蛋白的浓度。

检测原理


标本收集与试剂准备

1.血清、血浆样本收集应使用一次性的无热原,无内毒素试管(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可),血清、血浆避免使用溶血,高血脂标本,标本悬浮物应离心去除,使标本清澈透明。待测样本应尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-80℃)保存,避免反复冻融。
2.洗涤液配置:用蒸馏水1:20稀释(例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的蒸馏水)
3.标准品配制:取8个1.5ml离心管,分别标注S1,S2,S3,S4,S5,S6,S7,blank,第一管S1中加入标准品/样品稀释液900ul,第二至第八管中分别加入标准品/样品稀释液200ul,在第一管中加入(500ng/ml)标准品溶液100ul置于漩涡混合器上混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管,如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出200ul弃去,第八管为空白对照。
4.生物素化抗体工作液配置:使用前20分钟,用生物素化抗体稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×工作液,根据所需用量配置,当日使用,剩余弃之。
5.TMB显色液的配置:使用前10分钟,将TMB显色液A液和B液1:1混合,避光放置备用。
6.如果您检测的样本中靶蛋白浓度高于标准品最高值,建议重新检测,请根据实际情况,适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数)。

检测程序

1.加样∶空白孔加入50ul标准品/样品稀释液,其余孔各加入标准品或待测样品50ul,将反应板混匀后置37℃,40分钟。
2.洗板∶用1×洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,每孔加入1×洗液350ul,每次震荡/浸泡1-2分钟,向滤纸上印干。
3.空白孔加入100ul生物素化抗体稀释液,其余孔各加入1*的生物素化抗体工作液100ul,混匀后置37℃,30分钟。
4.洗板︰同上。
5.每孔加入SABC复合物工作液10Oul,混匀后置37℃,20分钟。
6.洗板︰同上。
7.每孔加入提前配置好的TMB混合液100ul,混匀后置37℃暗处反应10-20分钟(具体显色时间根据显色结果而定)。
8.每孔加入100ul终止液,混匀,30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

注意事项

1.在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测,每次检测都应做标准曲线。
2.洗涤过程很关键,洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高,从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶属于正常现象,37℃水浴使结晶完全溶解后再配制洗涤液。
3.检测时所有试剂都要恢复到室温,板条开封后剩余板条需封好,放回袋中1个月内用完。
4.试剂盒使用超敏TMB溶液,显色过深时会出现沉淀状,属正常现象,混匀即可,不影响结果判读。
5.说明书以试剂盒内纸质版为准,本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!



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